不同類型的Agilent液相色譜柱應該如何清洗？
更新時間：2020-07-23 點擊次數：2164次
Agilent液相色譜柱用于快速分離混合極性樣品，與C8或C18柱相比，疏水性較小，通?？墒褂盟喑煞指叩南疵撘?。對非極性化合物表現了更短的保留時間，對極性化合物幾乎沒有明顯影響。Agilent液相色譜柱是以液體作為流動相的一種色譜分析法，它亦是根據不同組分在流動相和固定相之間的分配系數的差異來對混合物進行分離的。氣相色譜中評價色譜柱柱效的方法及計算理論塔板數的公式同樣適合于高效液相色譜。那么該色譜柱應該如何進行清洗呢？下面我們一起來看看。
1、離子交換柱：長時間在緩沖溶液中使用和進樣，將導致色譜柱離子交換能力下降，用稀酸緩沖溶液沖洗可以使陽離子柱再生，反之，用稀堿緩沖溶液沖洗可以使陰離子柱再生。
2、正相柱：分別用正己烷（HPLC級），異丙醇（HPLC級），二氯甲烷（HPLC級），甲醇（HPLC級）等溶劑做流動相，順次沖洗，每種流動相流經色譜柱不少于20倍的柱體積（異丙醇粘度大，可降低流速，避免壓力過高）注意使用溶劑的次序不要顛倒，用甲醇沖洗完后，再以相反的次序沖洗至正己烷，所有的流動相必須嚴格脫水。
3、反相柱：常用方法：分別用甲醇：水=90:10，純甲醇（HPLC級），異丙醇（HPLC級），二氯甲烷（HPLC級）等溶劑作為流動相，依次沖洗，每種流動相流經色譜柱不少于20倍的色譜柱體積.然后再以相反的次序沖洗。
另外，還可以選擇能溶解柱內污染物的溶劑為流動相做正方向和反方向沖洗。但再生后的色譜柱柱效是不可能恢復到新柱的水平的.如果柱子裝反了，可以調回來，但可能會造成柱內擔體塌陷。在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。
在線咨詢